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進口elisa試劑盒做標準曲線樣品檢測時需要注意的幾個問題

更新時間：2020-05-09 點擊次數：2118次

　　進口elisa試劑盒做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意：

　　1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結果無從談起。

　　2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內。

　　3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。

　　4、檢測標準樣品時，應按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。

　　5、標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。

　　6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動，但一般來說，相關系數R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.

　　ELISA試劑盒實驗中注意事項：

　　1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

　　2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

　　3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

　　4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

　　5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6．底物請避光保存。

　　7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

　　8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

　　9．本試劑不同批號組分不得混用。

　　10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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